你问的“分开”应该是指草帽一伙被大熊拍飞、全员分散的剧情吧？如果是这个,答案是：

动画第405集（对应漫画第513话左右）。

具体是第405集《被夺走的伙伴们！草帽一伙的末日》，在香波地群岛，巴索罗米·熊将草帽一伙逐个拍飞到世界各地，路飞眼睁睁看着伙伴们一个个消失，最后自己也被拍飞到女儿岛，这是草帽一伙第一次真正意义上的“全员分开”。

如果你问的是其他“分开”（比如空岛篇、司法岛篇等），可以再具体说明一下场景,我帮你确认。